Waters Styragel色譜柱的使用指南

本章介紹了：

■ 色譜指南

■ 色譜柱校準(zhǔn)

a.色譜指南

凝膠滲透色譜柱的使用壽命有限，并且與其保養(yǎng)和使用狀況直接相關(guān)。樣品和洗脫劑的污染、頻繁的溶劑更換、操作和儲(chǔ)存方法不當(dāng)以及溫度循環(huán)都會(huì)縮短色譜柱壽命。

色譜柱使用指南

使用Waters Styragel色譜柱時(shí)，請(qǐng)遵守下列準(zhǔn)則：

■ 為獲得最佳的分離度和最長(zhǎng)的色譜柱壽命，各色譜柱的流速不得超過(guò)1.0 mL/min或反壓超過(guò)3.5 MPa（500 psi，35 atm，以系統(tǒng)反壓作校正）。

■對(duì)于溶劑高效色譜柱，為獲得最佳的分離度和最長(zhǎng)的色譜柱壽命，各色譜柱的流速不得超過(guò)0.3 mL/min或反壓超過(guò)3.5 MPa（500 psi，35 atm，以系統(tǒng)反壓作校正）。這些色譜柱的正常流速為0.3 mL/min。

■ 對(duì)色譜柱采取適當(dāng)保護(hù)，防止振動(dòng)和機(jī)械沖擊。

■ 最大限度減少溫度循環(huán)。

■ 防止溶劑組分快速改變而引起的色譜柱壓力迅速變化。

■ 更換為不同粘度的溶劑時(shí)，可能需要調(diào)節(jié)流速，從而使各色譜柱的反壓低于操作反壓指標(biāo)3.5 MPa（500 psi，35 atm）。

■ 將樣品溶解在流動(dòng)相中，避免沉淀。

■ 請(qǐng)始終使用高質(zhì)量的HPLC級(jí)溶劑。

■ 單個(gè)色譜柱最好用于特定應(yīng)用。頻繁切換樣品和溶劑會(huì)加速色譜柱退化和分離度的下降。

b.色譜柱校準(zhǔn)

只要更換了完整色譜柱組中的一根色譜柱，就應(yīng)重新生成校準(zhǔn)曲線(xiàn)，保證應(yīng)用的重現(xiàn)性。圖2、圖3和圖4顯示了一系列色譜柱的典型校準(zhǔn)曲線(xiàn)。此校準(zhǔn)曲線(xiàn)由聚苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)品獲得。